Introdução: A doença de Crohn (DC) é uma doença multifatorial caracterizada por inflamação granulomatosa transmural que afeta principalmente o íleo terminal e o cólon. O espessamento do tecido adiposo mesenterial (TAM) próximo à área intestinal afetada é uma característica da DC.
Objetivo: Avaliar marcadores inflamatórios no TAM de pacientes com DC correlacionando com o seu papel na patogênese desta doença.
Material e método: Foi realizado estudo transcricional total por meio de RNA sequencing (RNAseq), e os genes de interesse foram validados em uma coorte independente por PCR em tempo real (RT‐PCR). Trinta e um pacientes com DC ileocecal operados participaram do estudo, sendo obtidas amostras de TAM da região ileal do espécime cirúrgico. Destes, 8 pacientes compuseram a coorte do RNAseq e 23, a de validação biológica. O grupo controle foi composto por pacientes operados por outras doenças que não DII (4 RNAseq e 13 RT‐PCR). Somente amostras com número de integridade de RNA (RIN) maior que sete foram utilizadas. A análise de bioinformática foi realizada por meio do software DESeq. A análise preliminar do RNAseq se fundamentou em uma análise exploratória com agrupamento por meio de clusters hierárquicos e visualização por meio da análise dos componentes principais (PCA). Para as demais análises estatísticas, utilizou‐se teste não paramétrico, com p<0,05. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa.
Resultados: A análise do RNAseq mostrou aumento nos níveis transcricionais de CD79A (FC:14,64), presente em células linfocíticas B e aumento de CTLA4 (FC:4,93), relacionado com a inibição de células T, presente em células tolerogênicas, no TAM de pacientes com DC quando comparados ao grupo CTR. Esses achados foram validados na coorte independente por RT‐PCR: CD79A (p=0,0417) e CTLA4 (p=0,0012).
Conclusão: Este estudo demonstrou pela primeira vez a predominância de células B em detrimento a outras células imunes no TAM de pacientes com DC que podem estar participando da fisiopatogenia da doença.
